质粒图谱大全详解（质粒电泳）

1、质粒DNA电泳图与基因组DNA电泳图的区别：DNA显色带条数：质粒DNA电泳有3条带；而基因组DNA应该只有一条带或者两条带。

2、2、应用技术：质粒DNA电泳图与基因组DNA电泳图都是采用了凝胶电泳技术。

(相关资料图)

3、质粒DNA电泳会有三条带，最远的是线形DNA（lDNA）： 质粒的两条链均断裂；线性分子；中间的是开环DNA（ocDNA）： 质粒的一条链断裂；松弛的环状分子；共价闭合环状cccDNA： 质粒的两条链没有断裂；超螺旋。

4、质粒跑出来必须是三条带，只要的是最前端的那条带，既CCCDNA。

5、基因组DNA电泳一般是1条带，虽然在你抽提过程中也会发生断裂，形成几十至几百kb的大片段。

6、但是我们一般用1%的胶，无法区分不同大小的DNA，所以看起来像是一条带。

7、如果配成0.6%的胶再加lamda hindIII marker，适当延长跑胶时间，就应该会出现几条带了。

8、电泳的迁移率，取决于核酸分子本身的大小和构型，分子量较小的DNA分子比分子量较大的DNA分子迁移要快些。

9、这就是应用凝胶电泳技术分离DNA片段的基本原理。

10、扩展资料：DNA电泳技术分离时影响其迁移速率的因素：DNA的分子大小。

11、线状双链DNA分子在一定浓度琼脂糖凝胶中的迁移速率与DNA分子量对数成反比，分子越大则所受阻力越大，也越难于在凝胶孔隙中蠕行，因而迁移得越慢。

12、2、琼脂糖浓度。

13、一个给定大小的线状DNA分子，其迁移速度在不同浓度的琼脂糖凝胶中各不相同。

14、DNA电泳迁移率的对数与凝胶浓度成线性关系。

15、凝胶浓度的选择取决于DNA分子的大小。

16、3、DNA分子的构象。

17、DNA分子处于不同构象时，它在电场中移动距离不仅和分子量有关，还和它本身构象有关。

18、相同分子量的线状、开环和超螺旋DNA在琼脂糖凝胶中移动速度是不一样的，超螺旋DNA移动最快，而开环双链DNA移动最慢。

19、4、电源电压。

20、在低电压时，线状DNA片段的迁移速率与所加电压成正比。

21、但是随着电场强度的增加，不同分子量的DNA片段的迁移率将以不同的幅度增长，片段越大，因场强升高引起的迁移率升高幅度也越大。

22、要使大于2kb的DNA片段有效分离所加电压不得超过5V/cm。

23、5、嵌入染料的存在。

24、荧光染料溴化乙啶用于检测琼脂糖凝胶中的DNA，染料会嵌入到堆积的碱基对之间并拉长线状和带缺口的环状DNA，使其刚性更强，还会使线状DNA迁移率降低15%。

25、6、离子强度影响。

26、电泳缓冲液的组成及其离子强度影响DNA的电泳迁移率。

27、在没有离子存在时(如误用蒸馏水配制凝胶），电导率最小，DNA几乎不移动，在高离子强度的缓冲液中（如误加10×电泳缓冲液），则电导很高并明显产热，严重时会引起凝胶熔化或DNA变性。

28、参考资料来源：百度百科--凝胶电泳参考资料来源：百度百科--质粒参考资料来源：百度百科--基因组DNA质粒DNA电泳会有三条带，最远的是线形DNA（lDNA）： 质粒的两条链均断裂；线性分子；中间的是开环DNA（ocDNA）： 质粒的一条链断裂；松弛的环状分子；共价闭合环状DNA（cccDNA）： 质粒的两条链没有断裂；超螺旋这是由于在质粒提取过程中，机械力、酸碱度、试剂等的原因，使质粒DNA链发生断裂。

29、而质粒DNA相对于基因组DNA小很多，所以比较容易区分开基因组DNA电泳一般是1条带，虽然在你抽提过程中也会发生断裂，形成几十至几百kb的大片段。

30、但是我们一般用1%的胶，无法区分不同大小的DNA，所以看起来像是一条带。

31、如果配成0.6%的胶再加lamda hindIII marker，适当延长跑胶时间，就应该会出现几条带了正常质粒是闭合的双链DNA。

32、在电泳过程中可能使质粒发生开环，或者由开环解开螺旋变成线形。

33、这三种形态电泳时的分离率不同，分离速度不同，分成三带。

34、闭环（超螺旋），开环，线形的螺旋率依次降低质粒DNA电泳有3条带，而基因组DNA应该只有一条带或者两条带。

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关键词： 琼脂糖凝胶 参考资料 离子强度